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儀器知識

欣諭冷凍干燥機在基礎工藝以及多肽領域的應用

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       欣諭冷凍(dong)干(gan)燥機在基礎工藝以及多肽領域(yu)的應用

欣(xin)諭冷(leng)凍干(gan)燥機,凍干機,冷干機,真空(kong)冷(leng)凍干燥機是將含水(shui)物品(pin)預(yu)先凍結,然(ran)后(hou)(hou)將其水(shui)分在(zai)真(zhen)空狀態下升(sheng)華而獲得干(gan)燥物品(pin)的一(yi)種技術方法。經冷凍干(gan)燥處理的物品(pin)易于長(chang)期(qi)保(bao)存,加水(shui)后(hou)(hou)能恢(hui)復到凍干(gan)前的狀態并保(bao)持原由的生化特性(xing)。對(dui)于材料如石(shi)墨烯(xi),碳(tan)粉凍干(gan),熱敏(min)物(wu)質如抗菌素、疫(yi)苗(miao)、血液制品、酶激素和其它生(sheng)物(wu)制品如蛋白,多肽等,冷凍干(gan)燥技術(shu)更能顯(xian)示(shi)其優越性。

“欣(xin)諭(yu)”品(pin)牌(pai)冷凍(dong)(dong)干燥(zao)機采用風冷冷凝式制冷系統,冷阱可作預凍(dong)(dong),不銹鋼結構(gou),透(tou)明干燥(zao)室,便于觀察冷凍(dong)(dong)干燥(zao)的(de)全過程。    符合G際標準的綠(lv)色環保型

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首先講講欣諭凍(dong)干(gan)機的凍(dong)干工(gong)藝

一、技術(shu)簡介: 15272212206071.jpg

   XY真空冷凍干燥是先將制品凍結(jie)到共晶點溫度以下(xia),使(shi)水(shui)分變成固(gu)態的冰(bing),然后在適當的溫度和真空度下(xia),使(shi)冰(bing)升華為水(shui)蒸氣。再用真空系統的冷凝器(水汽凝結器)將水蒸氣(qi)冷凝,從而獲得干燥制品的技術。    技術優點:(1)它是在低溫下(xia)干燥,不使(shi)多肽,蛋白質、微生物之類產(chan)生變性或失去生物活力。這對于那些熱(re)敏性物質,如多肽(tai),疫苗、菌類、毒種、血液制品等的干燥保存特別適用。    2)由于是低溫干燥,使(shi)物(wu)質中(zhong)的揮發(fa)性(xing)成(cheng)分(fen)和(he)受(shou)熱變(bian)性(xing)的營養成(cheng)分(fen)損失很(hen)小(xiao),是化學制品(pin)、藥品(pin)和(he)食品(pin)的優質干燥方法。 

3)在低溫干燥過程中,微生物的(de)生長和酶的(de)作用幾乎無法進行(xing),能Z好地保持物質原來的(de)性狀。 

4)干(gan)燥后體(ti)積、形狀基本不(bu)變,物(wu)質呈海棉狀,無干(gan)縮;復水(shui)時,與水(shui)的接觸面大,能迅速還原成原來的性狀。 

5)因(yin)系真空下干燥,氧氣J少,使易氧化的物質得到了保護。 6)能除去物質中9599%的水分,制(zhi)品的保(bao)存期長 

二、凍干流程(cheng) 

   樣品(pin)預凍、升華干(gan)(gan)(gan)燥(第一干(gan)(gan)(gan)燥階段)、解(jie)析干(gan)(gan)(gan)燥(第二干(gan)(gan)(gan)燥階段)以及干(gan)(gan)(gan)燥后保存:   

  2.1樣品預凍階段(duan):   2.1.1 預凍過程變化 

      溶(rong)(rong)(rong)(rong)液在(zai)冷凍過程(cheng)中溶(rong)(rong)(rong)(rong)質和溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji)存在(zai)一(yi)個相互分離(li)的(de)(de)過程(cheng),大多數凍干藥品是以(yi)水(shui)為溶(rong)(rong)(rong)(rong)劑(ji),所以(yi)以(yi)水(shui)為例來(lai)說(shuo)明溶(rong)(rong)(rong)(rong)液的(de)(de)凝結(jie)(jie)過程(cheng)。隨著溫(wen)(wen)度(du)的(de)(de)下降(jiang)(jiang)到某一(yi)溫(wen)(wen)度(du)時,水(shui)開始結(jie)(jie)晶,這(zhe)時的(de)(de)溫(wen)(wen)度(du)是制(zhi)品的(de)(de)過冷溫(wen)(wen)度(du)。由(you)于(yu)結(jie)(jie)晶放熱(re),制(zhi)品溫(wen)(wen)度(du)開始升高(gao)后再下降(jiang)(jiang),隨著水(shui)結(jie)(jie)晶的(de)(de)增加,溶(rong)(rong)(rong)(rong)液的(de)(de)濃度(du)會增加(為了(le)有利于(yu)干燥,一(yi)般凍干產品溶(rong)(rong)(rong)(rong)液配制(zhi)成含固體(ti)物質4%-15%的稀有溶(rong)液)。此外,根據(ju)產品的性質不同(tong),這時會(hui)有兩種情況: 

一(yi)(yi)種是溶(rong)質可以結晶(jing)(jing)(jing)的產品,隨著制品溫度(du)的下(xia)降,稀溶(rong)液變為濃溶(rong)液,并逐步成為飽和溶(rong)液,溫度(du)繼續降低(di)(di)時,由于溶(rong)解度(du)降低(di)(di),將會有(you)(you)溶(rong)質析出,Z后成為冰(bing)晶(jing)(jing)(jing)體和溶(rong)質晶(jing)(jing)(jing)體的共晶(jing)(jing)(jing)混合物(wu),晶(jing)(jing)(jing)體的大小(xiao)和冷(leng)凍速率有(you)(you)關,這時的溫度(du)就是產品的共晶(jing)(jing)(jing)點溫度(du)。這個過(guo)程(cheng)也是一(yi)(yi)個放熱過(guo)程(cheng),在冷(leng)凍曲(qu)線(xian)上也出現過(guo)冷(leng)和平臺(tai)。 

另一種是溶質(zhi)不結晶(jing)(jing)的(de)(de)產品,隨著制(zhi)品溫(wen)度(du)的(de)(de)下降,稀溶液變為(wei)濃溶液,溫(wen)度(du)繼續降低(di)時(shi),溶液以玻(bo)璃(li)態(tai)形(xing)式凍結,這(zhe)時(shi)的(de)(de)溫(wen)度(du)就是產品的(de)(de)凍結溫(wen)度(du)。在(zai)冰晶(jing)(jing)的(de)(de)間隙中就形(xing)成(cheng)了微觀(guan)的(de)(de)玻(bo)璃(li)態(tai)結構。 

     預(yu)凍(dong)會對(dui)細胞和生命產生一(yi)(yi)定的(de)(de)破(po)壞作用(yong),其機(ji)理是非(fei)常復雜的(de)(de),一(yi)(yi)般認為(wei),預(yu)凍(dong)過(guo)程中(zhong)水結冰所(suo)產生的(de)(de)機(ji)械(xie)效應(ying)和溶(rong)質效應(ying)是引(yin)(yin)起生化(hua)藥品(pin)在(zai)凍(dong)干過(guo)程中(zhong)失活或變(bian)性(xing)的(de)(de)重要因素(su)。機(ji)械(xie)效應(ying)是指(zhi)水結冰時體積增(zeng)大,致使活性(xing)物(wu)質活性(xing)部(bu)位中(zhong)一(yi)(yi)些弱分子力鍵受到(dao)破(po)壞,從而使活性(xing)損失;溶(rong)質效應(ying)是指(zhi)水結冰以后引(yin)(yin)起溶(rong)質濃(nong)度上升(sheng)以及由于各(ge)種溶(rong)質在(zai)各(ge)種溫(wen)度條件下溶(rong)解度變(bian)化(hua)不一(yi)(yi)致引(yin)(yin)起pH值(zhi)的變化(hua),導致活(huo)性物質所處的環(huan)境發生變化(hua)而造成失活(huo)或變性。 

2.1.2 常見預凍方(fang)法及控制 

     冷(leng)凍(dong)方式(shi)要(yao)根據產(chan)品(pin)的特(te)性,采用慢凍(dong)、快凍(dong)、預凍(dong)退火: 

     一般(ban)來說,預(yu)凍速度越(yue)快,形(xing)成的晶體(ti)顆粒越(yue)小,越(yue)有利于后(hou)期(qi)干燥的進(jin)行(xing),同時,一般(ban)制品預(yu)凍溫度在共熔(rong)點以下10-20℃保持(chi)2-3h,保證冷凍完全。預凍速度決(jue)定了制品體積大小、形狀和成品Z初(chu)晶格及其微孔的特性,其速度可(ke)控制在每(mei)分(fen)鐘降(jiang)溫1℃左右(you)。 

對(dui)結晶(jing)性制(zhi)(zhi)劑而(er)言,凍(dong)結速(su)度一般不要太慢,凍(dong)結速(su)度慢雖然便于形成大(da)塊冰晶(jing)體,維(wei)持通(tong)暢的(de)升華(hua)通(tong)道,使(shi)升華(hua)速(su)度加快,但如果結晶(jing)過大(da)、晶(jing)核(he)數量過少、制(zhi)(zhi)劑的(de)結晶(jing)均勻性差,也不利(li)(li)于升華(hua)干(gan)燥(zao)。對(dui)于一些(xie)分子呈無規則網狀(zhuang)結構的(de)高分子藥(yao)物,速(su)凍(dong)能使(shi)其在藥(yao)液(ye)中迅速(su)定(ding)型,使(shi)包裹(guo)在其中的(de)溶(rong)媒蒸汽在真空(kong)條件(jian)下迅速(su)逸出,反而(er)能使(shi)升華(hua)速(su)度加快。因此(ci),溶(rong)液(ye)的(de)Z佳(jia)冷(leng)凍(dong)速(su)度是(shi)(shi)因制(zhi)(zhi)劑本(ben)身的(de)特性不同(tong)而(er)變化的(de)。如蛋白多肽類(lei)藥(yao)物的(de)凍(dong)干(gan),慢速(su)凍(dong)結通(tong)常是(shi)(shi)有利(li)(li)的(de),而(er)對(dui)于病毒、疫苗來說,快速(su)降(jiang)溫通(tong)常是(shi)(shi)有利(li)(li)。 

控制: 1、探索Z佳預凍速率        2、合理控制(zhi)預凍(dong)溫度 

       3、適當控(kong)制及調整(zheng)預凍時間        

2.2升華干燥(干燥第一階段) 

  一(yi)次干燥(升華干燥)是指低溫(wen)下對制品加熱,同時(shi)XY凍干專(zhuan)用真空泵抽真空,使其中被凍(dong)結(jie)成(cheng)(cheng)冰的自(zi)由水直接升華(hua)成(cheng)(cheng)水蒸氣(qi)。待成(cheng)(cheng)品中看不到(dao)冰時(shi),則可認為一(yi)次(ci)干燥已完畢,此時(shi)制品溫(wen)度(du)迅速上升,接近板溫(wen),制品中Z初水分的90%以上已被(bei)除去。 

  在升(sheng)華干燥過程(cheng)(cheng)中,制(zhi)品吸收熱量后所含水分(fen)在真空下(xia)升(sheng)華成水蒸氣,消耗大量熱能(neng),使得制(zhi)品溫(wen)度(du)較板層溫(wen)度(du)低(di)十(shi)(shi)幾(ji)甚至幾(ji)十(shi)(shi)度(du)。在該干燥過程(cheng)(cheng)中,如果溫(wen)度(du)過高,會出(chu)現(xian)軟(ruan)化(hua)、塌陷(xian)等現(xian)象,造(zao)成凍干失(shi)敗;如果溫(wen)度(du)過低(di),不(bu)僅給(gei)制(zhi)冷(leng)系統提出(chu)了過高的(de)要求,而且(qie)大大降低(di)了升(sheng)華過程(cheng)(cheng)的(de)速率,費時又耗能(neng)。 

該過程中(zhong),主要把握(wo)溫度(du)(du)和真(zhen)空(kong)度(du)(du)。干燥(zao)過程中(zhong),隨(sui)外界(jie)真(zhen)空(kong)度(du)(du)變化(hua),界(jie)面層傳熱(re)性也會隨(sui)之變化(hua),對于(yu)不同的(de)產(chan)品特性,真(zhen)空(kong)度(du)(du)大小(xiao)不同,一般(ban)而言(yan)保持(chi)在1030Pa(可依據實際情況作調(diao)整或在50100Pa),與此同時,溫(wen)度(du)的(de)把握也(ye)至關(guan)重要。升(sheng)溫(wen)速度(du)及溫(wen)度(du)保(bao)(bao)持時間(jian),大多數而言,為保(bao)(bao)證樣品(pin)完整度(du),升(sheng)溫(wen)速度(du)可以控(kong)制在5/h,過快(kuai)導(dao)致(zhi)大量水分不能及時出(chu)去,造成制品溫(wen)度(du)超過共(gong)晶點而融化。溫(wen)度(du)限度(du)上應當保持在共(gong)熔點或產(chan)品崩解(jie)溫(wen)度(du)以下,以防(fang)止樣品復(fu)熔或塌陷。 

升華階段(duan)結束標(biao)志或判斷方法:1、外觀(guan)上(shang),干(gan)燥(zao)層和凍結層交(jiao)界(jie)面到達瓶底(di)并消失     2、曲線,產品的溫(wen)度上升或者平(ping)行于導熱油溫(wen)度                              2.3解析干(gan)燥 

     此(ci)階段為(wei)干(gan)燥第二階段,在(zai)第一(yi)(yi)階段干(gan)燥結束(shu)后(hou),在(zai)干(gan)燥物質(zhi)的(de)(de)(de)毛細血(xue)管壁和J性(xing)基團上還吸附(fu)有一(yi)(yi)部分(fen)(fen)水(shui)分(fen)(fen),這(zhe)些(xie)水(shui)分(fen)(fen)是(shi)未被凍結的(de)(de)(de),當他(ta)們達到(dao)一(yi)(yi)定(ding)含(han)量,就為(wei)微(wei)生物的(de)(de)(de)生長(chang)繁殖和某些(xie)化(hua)學反應提(ti)供了(le)條(tiao)件。實驗證明:即使是(shi)單分(fen)(fen)子層吸附(fu)以下的(de)(de)(de)低含(han)水(shui)量,也可以成為(wei)某些(xie)化(hua)和物的(de)(de)(de)溶(rong)液,產生與(yu)水(shui)溶(rong)液相同的(de)(de)(de)移動(dong)性(xing)和反應性(xing)。因(yin)此(ci)為(wei)了(le)改善(shan)產品的(de)(de)(de)儲存穩定(ding)性(xing),延長(chang)其(qi)保存期,需要除去這(zhe)些(xie)水(shui)分(fen)(fen)。這(zhe)就是(shi)解(jie)析干(gan)燥的(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)。 

第(di)一階段(duan)是將水以(yi)(yi)冰晶的(de)(de)形(xing)式除去,因此(ci)其溫(wen)(wen)度和壓力(li)都(dou)必須控制在(zai)產(chan)(chan)品(pin)(pin)共(gong)溶點以(yi)(yi)下(xia),才不致使(shi)冰晶溶化(hua)。但(dan)對于(yu)吸(xi)附(fu)水,由(you)于(yu)其吸(xi)附(fu)能(neng)(neng)量高(gao),如果(guo)不給它(ta)(ta)們提(ti)供足夠的(de)(de)能(neng)(neng)量,如果(guo)不給它(ta)(ta)們提(ti)供足夠的(de)(de)能(neng)(neng)量,它(ta)(ta)們就(jiu)不可能(neng)(neng)從(cong)吸(xi)附(fu)中解析出來。因此(ci),這一階段(duan)產(chan)(chan)品(pin)(pin)的(de)(de)溫(wen)(wen)度應足夠的(de)(de)高(gao),只要(yao)燒毀產(chan)(chan)品(pin)(pin)和不造(zao)成(cheng)主品(pin)(pin)過熱(re)而變(bian)性就(jiu)可,由(you)于(yu)這一部分(fen)(fen)水分(fen)(fen)是通過范(fan)德(de)華力(li)、氫(qing)鍵(jian)等弱分(fen)(fen)子(zi)力(li)吸(xi)附(fu)在(zai)藥品(pin)(pin)上的(de)(de)結(jie)合水,因此(ci)要(yao)除去這部分(fen)(fen)水,需(xu)要(yao)克服分(fen)(fen)子(zi)間的(de)(de)力(li),需(xu)要(yao)更多(duo)的(de)(de)能(neng)(neng)量。此(ci)時可以(yi)(yi)把制品(pin)(pin)溫(wen)(wen)度加熱(re)到其允許(xu)的(de)(de)Z高(gao)溫(wen)(wen)度以(yi)(yi)下(xia)(產(chan)(chan)品(pin)(pin)的(de)(de)允許(xu)溫(wen)(wen)度視產(chan)(chan)品(pin)(pin)的(de)(de)品(pin)(pin)種而定,一般為25-40℃左右(you)。病毒性產(chan)品為(wei)25℃,細菌(jun)性產品(pin)為(wei)30℃,血清、抗菌(jun)素(su)等(deng)可高達40℃)。 

三、常見問(wen)題及解決方法  如下圖:

圖片1.jpg

 

典型的凍干產品塊,其中(a)是良好的產品塊(b)有(you)硬(ying)殼或凍膠層的結構(gou)不均(jun)一產(chan)品塊(kuai)(c)自我(wo)支撐結(jie)構(gou)弱的(de)產品塊(d)部分(fen)塌陷的(de)產(chan)品(pin)塊(e)復溶(f)消失(shi)的產品塊(kuai)(g)凸起  

如圖a?產(chan)品塊性質應該多孔而有彈性,并且一般(ban)表觀(guan)均(jun)一,包括結構和顏(yan)色,。在(zai)有高過冷度(du)(>10 )的(de)產(chan)品(pin)中,產(chan)品(pin)塊(kuai)結構良好,像壓好的(de)藥片。凍干產(chan)品(pin)塊(kuai)的(de)體(ti)(ti)積(ji)(ji)應(ying)該和(he)填充液體(ti)(ti)的(de)原始體(ti)(ti)積(ji)(ji)接近(jin)。圖(tu)b?是冷凍過(guo)程不(bu)合(he)適(shi)造成的(de)(de)結構(gou)不(bu)均(jun)一的(de)(de)產(chan)品塊(kuai)。在該圖(tu)的(de)(de)底部是結構(gou)良好的(de)(de)區域,表明一部分(fen)溶液經歷(li)了過(guo)冷。產(chan)品塊(kuai)的(de)(de)中間部分(fen)是長針狀冰(bing)晶慢速生(sheng)長的(de)(de)結果。該基(ji)質的(de)(de)頂部是一個硬(ying)殼或(huo)凍膠層(ceng)。硬(ying)殼或(huo)凍膠層(ceng)不(bu)但阻礙 蒸汽從產品塊中流出,而且濃縮溶質(zhi),使活性成分變(bian)性 的(de)幾率變大(da)。可(ke)以改變降溫工(gong)藝并使更多體積的(de)溶液(ye)在(zai) 干燥(zao)過程開始前經歷過冷來避免(mian)這(zhe)種基(ji)質。 

c?是(shi)裂(lie)(lie)開的基質。容器頂部附近(jin)的物(wu)質是(shi)第二階段干燥(zao)階段物(wu)質離開容器的證明。大多數情況下(xia),斷裂(lie)(lie)基質是(shi)由于固(gu)體(ti)物(wu)質的百分比小(xiao)于2%,產品塊(kuai)(kuai)的(de)結(jie)構脆弱造成(cheng)的(de)可以用減慢第二階(jie)段(duan)干燥(zao)的(de)速(su)度來(lai)限制(zhi)物(wu)質(zhi)的(de)損失,但是(shi)(shi)增加整體(ti)賦形劑的(de)濃度來(lai)加強產品塊(kuai)(kuai)的(de)結(jie)構將(jiang)是(shi)(shi)更好的(de)選(xuan)擇。塌(ta)陷(xian)和產品塊(kuai)(kuai)從容器(qi)壁凸起是(shi)(shi)典型的(de)現象,在(zai)第一階(jie)段(duan)干燥(zao)過程中干燥(zao)溫(wen)度高于(yu)塌(ta)陷(xian)溫(wen)度時(shi)(shi)會發生這種(zhong)情況(kuang)。當溫(wen)度高于(yu)塌(ta)陷(xian)溫(wen)度時(shi)(shi),將(jiang)有足夠多的(de)自由(you)水存在(zai),使間(jian)隙(xi)物(wu)質(zhi)在(zai)第二階(jie)段(duan)干燥(zao)完成(cheng)前移動。消除這種(zhong)基質(zhi)形成(cheng)的(de)Z好辦法是(shi)(shi)知(zhi)道塌(ta)陷(xian)溫(wen)度并(bing)采取步驟確保第一階(jie)段(duan)干燥(zao)階(jie)段(duan)在(zai)該(gai)溫(wen)度以下進.  

e?表示復(fu)溶。這種情(qing)況(kuang)中,有足夠的(de)自(zi)由水存在(zai)(zai)而(er)引起產品塊(kuai)的(de)完全塌陷。在(zai)(zai)這種形式下(xia),產品塊(kuai)的(de)復(fu)水可能(neng)耗時很長(chang)。知道(dao)融解溫度并調節第一階段干燥的(de)溫度使其Z少在(zai)(zai)融解溫度以下(xia)5℃,可以避免復溶的發生.

多(duo)肽的(de)保存 

  多肽一般是以(yi)凍干粉的形式保存,其在-20℃很穩定,特別是冷凍干燥后并保存于-20℃干(gan)燥器中,大(da)多數肽(tai)在(zai)此(ci)溫(wen)度下可以(yi)存放(fang)幾年不(bu)(bu)變。如果一次使用的肽(tai)量不(bu)(bu)多,Z好(hao)分(fen)裝(zhuang)成幾個小(xiao)包裝(zhuang),取用更為(wei)方(fang)便。為(wei)減少濕度的影響(xiang),在(zai)將(jiang)凍(dong)干(gan)肽(tai)暴露于空氣(qi)之前,應先將(jiang)其在(zai)干(gan)燥的條(tiao)件(jian)下恢復至室溫(wen)。當無法冷凍(dong)干(gan)燥時,Z好(hao)的方(fang)法是以(yi)較(jiao)小(xiao)的樣量存放(fang),并盡快使用。   對于(yu)含Met,CysTrp的多肽,脫(tuo)氧(yang)緩沖劑對其保(bao)護必不可少(shao),因為這種多肽易被空氣氧(yang)化(hua),比較好(hao)的解決方(fang)法是可以(yi)在封瓶前,慢慢通入氮氣或氬氣流(liu)從而降低氧(yang)化(hua)作(zuo)用(yong)。含GlnAsn的(de)多肽也容易(yi)降(jiang)解(jie),所以相對于其他不含此類氨基(ji)酸的(de)多肽,其保(bao)存(cun)期(qi)較短。 多肽的溶(rong)解性(xing) 

多(duo)肽的(de)溶解性與其(qi)序列(lie)的(de)組成(cheng)有很大關系(xi)。一般來說,含親(qin)水性氨(an)基酸較(jiao)多(duo)的(de)序列(lie),其(qi)溶解性相對(dui)較(jiao)好,這樣的(de)氨(an)基酸如(ru):Lys, His, Arg等。含有疏水性較強(qiang)的殘基如:Ala, Leu, ,Ile, Cys, Met, PheVal等將增(zeng)加多肽溶(rong)解的難度(du)。 

    大多數肽的首選溶劑是無(wu)菌的純凈蒸餾(liu)水。這些方法不溶的多肽, 需要乙腈(jing)、脲、DMF、鹽(yan)酸胍(gua)來(lai)溶解,但這(zhe)些溶劑可能(neng)會對某些實驗產(chan)生副作(zuo)用(yong)。   

  初次(ci)溶(rong)解(jie)時,一般使(shi)初始濃度(du)大于(yu)要求濃度(du),如果多(duo)肽的溶(rong)解(jie)性有(you)限,可以加入其(qi)它溶(rong)解(jie)劑(ji)或緩(huan)沖(chong)鹽。 

如果(guo)多肽在水中的(de)溶解性有限,有幾種選擇可(ke)幫助(zhu)溶解:   超聲波處理(li) 

  酸(suan)性肽用10%稀(xi)氨(an)水(shui)(含Asp, Glu 

  堿性肽用10%稀乙酸(suan)(含 Lys , His ,Arg   疏水性(xing)強的(de)肽(tai)用10%溶劑(乙腈、甲(jia)醇)   J不溶的肽用DMSO或(huo)DMF溶解   鹽(yan)酸胍或脲(niao)的濃(nong)溶液也很有用。 多肽溶液(ye)的保存 

溶(rong)(rong)液形式(shi)的多肽遠比凍干形式(shi)不穩(wen)定,溶(rong)(rong)液應為(wei)中性pH(pH5-7), -20℃保存,為避免樣品的反復凍融, Z好(hao)分成(cheng)小樣存(cun)放。一份樣品解(jie)凍后未(wei)用(yong)完, 應扔掉,細菌(jun)降解有(you)時會(hui)成為溶液肽(tai)的麻煩, 因(yin)此,肽應溶于無菌水, 或肽溶液(ye)用(yong)0.2μ M濾膜過濾,后再置(zhi)于-20℃保存(cun)更好。 

多(duo)肽的含量(liang)與純度 

多(duo)(duo)肽的含量(liang)與(yu)多(duo)(duo)肽的純(chun)度是兩(liang)個完全不同的概念(nian)。多(duo)(duo)肽的含量(liang)反映的是凍干(gan)肽中多(duo)(duo)肽與(yu)其它組分的關系。 

而多肽的(de)純度則是反映了(le)目的(de)肽與其它雜肽的(de)純度關系。多肽的(de)純度可以通過計算在紫外檢測下(210-220nm)從HPLC色譜中(zhong)洗脫出(chu)的物質的主峰的面積(ji)百分比(bi)獲得。

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